本篇文章給大家談?wù)劯呒兌纫合嗌V儀,以及高效液相色譜純度分析對應(yīng)的知識點,希望對各位有所幫助,不要忘了收藏本站喔。
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液相色譜儀主要測什么
液相色譜儀(HPLC)是一種重要的分析儀器,它可以用來分離、鑒定和測定各種化合物。它的原理是將待測物質(zhì)在液相中進行分離,然后通過檢測器檢測各種化合物的濃度,并生成相應(yīng)的信號。
液相色譜儀的主要測定對象 **蛋白質(zhì)測定**:液相色譜法能夠精確分析蛋白質(zhì)分子的組成和結(jié)構(gòu)特征。在蛋白質(zhì)研究中,液相色譜儀是一個不可或缺的工具。 **藥物成分分析**:在制藥行業(yè)中,液相色譜儀常用于分析藥物的純度、穩(wěn)定性以及藥效成分等關(guān)鍵參數(shù)。這些分析有助于確保藥物的質(zhì)量和安全性。
液相色譜儀主要測量混合物中各個成分的種類與含量。液相色譜儀是一種高效且精確的分離分析技術(shù)設(shè)備,廣泛應(yīng)用于化學(xué)、生物、醫(yī)藥、環(huán)境科學(xué)等領(lǐng)域。其核心原理是利用不同物質(zhì)在固定相和移動相之間分配平衡的差異,將混合物中的各個成分分離開來。
高效液相色譜法對測試樣品有什么要求
在使用高效液相色譜儀進行測試時,如果采用高純度液相色譜儀的是紫外檢測器,那么樣品必須具備紫外吸收特性。如果沒有紫外吸收,可以選擇使用熒光檢測器或蒸發(fā)光檢測器??傊?,樣品的主成分必須能夠?qū)z測器產(chǎn)生響應(yīng)信號。在進行樣品檢測之前,需要將其配制成一定濃度的溶液。配制溶液時,要根據(jù)樣品的溶解度來選擇合適的溶劑。
如果高效液相色譜儀的檢測器是紫外檢測器的話,首先要保證樣品具有紫外吸收,如果沒有紫外吸收的話可選擇熒光檢測器、蒸發(fā)光檢測器等等,總而言之需要你的樣品主成分在檢測器上有響應(yīng)信號。
在進行高效液相色譜法(HPLC)的標(biāo)準(zhǔn)曲線實驗時,首先需要選擇合適的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。以物質(zhì)X為例,其標(biāo)準(zhǔn)濃度范圍設(shè)定為0.1mg/mL至2mg/mL。接下來,配制樣品時應(yīng)取一定量的物質(zhì)X,并制備成高濃度的母液,例如10mg/mL。
本組題考查高效液相色譜系統(tǒng)適用性試驗的指標(biāo)要求。色譜柱的理論板數(shù)(n)應(yīng)符合規(guī)定高純度液相色譜儀;定量析時,對分離度(R)的要求應(yīng)大于1.5高純度液相色譜儀;童復(fù)性試驗中,取各品種項下的對照品液,連犢進樣5次,除另有規(guī)定外,其峰面測量值的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)應(yīng)不大于20%;用峰高法定量時,拖尾因子(r)應(yīng)在095~1.05。
高效液相色譜法對流動相的基本要求有 (1)溶劑對于待測樣品。必須具有合適的極性和良好的選擇性。(2)溶劑要與檢測器匹配。對于紫外吸收檢測器,應(yīng)注意選用檢測器波長比溶劑的紫外截止波長要長。
流動相要選擇正確:有效成分和待檢成分必須完全溶解于流動相,防止其析出堵塞儀器。進樣前必須過濾:未過濾的樣品絕對不能進入儀器。最好在柱子前段加預(yù)柱:預(yù)柱可以延長柱子的使用壽命。
高效液相色譜儀對流動相有哪些要求?
選用的溶劑應(yīng)當(dāng)與固定相互不相溶,并能保持色譜柱的穩(wěn)定性。選用的溶劑應(yīng)有高純度,以防所含微量雜質(zhì)在柱中積累,引起柱性能的改變。選用的溶劑性能應(yīng)與所使用的檢測器相匹配,如果使用紫外吸收檢測器,就不能選用在檢測波長下有紫外吸收的溶劑;若使用視差折光檢測器,就不能用梯度洗脫。
高效液相色譜法對流動相的基本要求有 (1)溶劑對于待測樣品。必須具有合適的極性和良好的選擇性。(2)溶劑要與檢測器匹配。對于紫外吸收檢測器,應(yīng)注意選用檢測器波長比溶劑的紫外截止波長要長。
樣品在流動相中應(yīng)有適宜的溶解度,防止產(chǎn)生沉淀并在柱中沉積。流動相粘度低(粘度適中)。若使用高粘度溶劑,會增高壓力,不利于分離。常用低粘度溶劑有丙酮、甲醇和乙腈等。但粘度過低的溶劑也不宜采用,如戊烷等,它們?nèi)菀自谏V柱和檢測器內(nèi)形成氣泡,影響分離?;瘜W(xué)穩(wěn)定性好。
高效液相色譜儀主要類型
1、高效液相色譜儀主要分為液固吸附色譜、液液分配色譜、鍵合相色譜和凝膠色譜四種類型,每種都有其獨特的分離原理和應(yīng)用場合。 液固吸附色譜:分離原理基于各組分對固體吸附劑的吸附差異。
2、高效液相色譜儀主要分為三類:正相高效液相色譜儀、反相高效液相色譜儀和超高效液相色譜儀。正相高效液相色譜儀雖然名稱中有“高效”二字,但在實際應(yīng)用中并不常見。它使用非極性溶劑作為流動相,硅膠顆粒作為固定相。由于極性化合物在固定相上的吸附時間較長,而非極性化合物則更易被洗脫。
3、液相色譜檢測器是樣品組成和含量變化的轉(zhuǎn)化器,常用類型有紫外吸收、熒光、示差折光、化學(xué)發(fā)光等。其中,紫外吸收檢測器因其廣泛應(yīng)用和高靈敏度而著名,但要求樣品有紫外-可見光吸收且流動相無干擾。光電二極管陣列檢測器提供三維色譜光譜圖,有助于快速定性和定量分析。
4、高效液相色譜是一種廣泛應(yīng)用的分離技術(shù),它根據(jù)不同的原理分為多種類型,每種類型都有其獨特的分離機制。首先,吸附色譜,也稱為吸附層析,是基于樣品在固定相和流動相之間的吸附差異進行分離,通過改變流動相性質(zhì),使不同極性或親和性的分子分離。
5、高效液相色譜儀分為分析型和制備型兩種,按流量大小分類。您說的10A,15A,是指的日本島津SHIMADZU品牌的LC10ATvp型和LC-15A型,前者已經(jīng)停產(chǎn),15A是10A的升級換代產(chǎn)品。
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