本篇文章給大家談?wù)勔合嗌V儀活化，以及液相色譜儀的工作流程對應(yīng)的知識點(diǎn)，希望對各位有所幫助，不要忘了收藏本站喔。
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十問十答|關(guān)于液相色譜柱使用中的常見問題解答
反相色譜柱初次使用時，采用純有機(jī)試劑如甲醇、乙腈，從低流速開始，逐步提升至常規(guī)使用流速，沖洗總體積建議為柱體積的20倍。此步驟有助于固定相充分濕潤，碳鏈?zhǔn)嬲归_，使色譜柱性能達(dá)到最佳狀態(tài)，并檢查壓力和基線。
液相色譜柱的保養(yǎng)方法?
先以0.1~-0.2ml/min的流速沖洗，等看到有液體從柱子中流出后，持續(xù)10mins之后再接上檢測器，以循序漸進(jìn)方式將流速調(diào)至0ml/min(LC/MS柱子應(yīng)以0.2ml/min的流速進(jìn)行)，繼續(xù)活化2小時。
對于液相色譜柱的保養(yǎng)，首先要注意的是儲存條件。未使用時，應(yīng)將液相色譜柱儲存在干燥、陰涼、避光和無塵的環(huán)境中，以防止柱內(nèi)填料受潮或受污染。長期不使用的柱子，應(yīng)使用適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)劑或溶劑保存，如純甲醇或乙腈，以保持柱子的穩(wěn)定性和分離效果。其次，定期清洗是液相色譜柱保養(yǎng)的重要環(huán)節(jié)。
反相柱的維護(hù)可以通過特定的沖洗步驟來延長其使用壽命。首先，用10%甲醇以0流速沖洗一個小時，接著用純甲醇繼續(xù)清洗45-60分鐘。如果效果不佳，可以嘗試用甲醇與水按照5：95的比例進(jìn)行沖洗，之后再用甲醇沖洗。異丙醇也是一種有效選擇，其效果比甲醇更好。通過適當(dāng)?shù)臎_洗操作，可以保持柱子的良好柱效。
反相色譜柱每天實(shí)驗(yàn)后的保養(yǎng)：使用緩沖液或含緩沖鹽的流動相，實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)用20-30柱體積的甲醇或乙腈和水的50：50混合物進(jìn)行沖洗。如需過夜保存，可將流速保持在 0.1 到 0.2 mL/min。注意：不能用純水沖洗柱子，應(yīng)該在水中加入10%的甲醇，防止將填料沖塌陷。
氰基液相色譜柱在使用前怎么進(jìn)行活化處理
原理：高效液相色譜法的原理是在原始的經(jīng)典色譜法基礎(chǔ)上面引用氣象色諧的理論，色譜柱則是用特殊的方式用小顆粒裝填而成，造成的結(jié)果就是色譜柱的柱效遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于原始的經(jīng)典液相色諧，它柱子使用后還能具有高度靈敏度檢測器。能夠?qū)α鞒鰜淼姆治鑫镞M(jìn)行連續(xù)檢測。
高效液相色譜柱的填充劑選擇直接關(guān)系到分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。常見的填充劑包括化學(xué)鍵合硅膠，如十八烷基硅烷鍵合硅膠、辛基硅烷鍵合硅膠、氰基鍵合硅烷和氨基鍵合硅烷等。
高效液相色譜是色譜法的一個重要分支，以液體為流動相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進(jìn)入檢測器進(jìn)行檢測，從而實(shí)現(xiàn)對試樣的分析。
液相色譜柱應(yīng)該如何活化?
1、清洗氨基柱的方法取決于其使用條件。若在正相條件下使用，首先使用50倍柱體積的異丙醇清洗，需適當(dāng)降低流速；然后用50倍的甲醇清洗；接著用異丙醇過渡回正相流動相。
2、因此，在首次使用時，沒有必要用水進(jìn)行沖洗，只要用流動相徹底地平衡色譜柱即可。如果使用流動相添加劑（如緩沖液或離子對試劑），建議使用含原有比例但不含這些添加劑的流動相進(jìn)行中間過渡。使用10至20個色譜柱體積進(jìn)行沖洗將有助于過渡到流動相。
3、首先用50倍柱體積的異丙醇清洗，因異丙醇粘度較大需適當(dāng)放低流速；之后，用50倍的甲醇清洗；之 后，用異丙醇過渡回到平常使用的正相流動相，即可。（2）平時在反相條件下使用：緩沖鹽應(yīng)及時沖洗，不能直接用純甲醇沖洗緩沖鹽等，屬常識就不作特別交待。
4、酸性活化：將柱子用酸性溶液進(jìn)行洗滌，如使用 0.1 M 的鹽酸、甲酸或乙酸等溶液。這可以去除柱子上的堿性雜質(zhì)，并幫助恢復(fù)其親水性。堿性活化：將柱子用堿性溶液進(jìn)行洗滌，如使用 0.1 M 的氫氧化鈉或氫氧化鉀等溶液。這可以去除柱子上的酸性雜質(zhì)，并幫助恢復(fù)其疏水性。
5、液相色譜柱的活化、維護(hù)與注意事項(xiàng)液相色譜柱根據(jù)極性差異分為正相柱（如硅膠表面鍵合CN或NH3柱）和反相柱（如C18柱），以及離子交換柱、GPC柱等。使用前，需進(jìn)行性能測試并記錄，確保柱子在最佳條件下。
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