本篇文章給大家談?wù)劯咝б合嗌V儀走基線,以及高效液相色譜儀基線噪聲和基線漂移怎么計(jì)算對(duì)應(yīng)的知識(shí)點(diǎn),希望對(duì)各位有所幫助,不要忘了收藏本站喔。
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高效液相色譜步驟
安捷倫高效液相的詳細(xì)操作步驟如下:開(kāi)機(jī)準(zhǔn)備:先開(kāi)儀器:確保高效液相色譜儀的各個(gè)部件處于待機(jī)狀態(tài)。后開(kāi)電腦及操作軟件:?jiǎn)?dòng)電腦并打開(kāi)安捷倫高效液相色譜的操作軟件。柱子沖洗:純甲醇沖洗:使用經(jīng)過(guò)過(guò)濾膜并超聲脫氣的純甲醇沖洗色譜柱,以去除柱子中的雜質(zhì)。
高效液相色譜儀操作流程為開(kāi)機(jī)、超聲、排氣、走基線。開(kāi)機(jī)前先將流動(dòng)相過(guò)濾和超聲:水流動(dòng)相用混合濾膜(0.2μm)過(guò)濾,有機(jī)流動(dòng)相用有機(jī)濾膜過(guò)濾,之后超聲脫氣15-20分鐘。
操作步驟:首先是樣品前處理,要確保樣品均勻且符合進(jìn)樣要求,去除雜質(zhì)等。接著準(zhǔn)備流動(dòng)相,根據(jù)分析需求精確配置合適比例的溶劑體系。之后開(kāi)啟儀器,進(jìn)行系統(tǒng)平衡,使儀器達(dá)到穩(wěn)定工作狀態(tài)。再將處理好的樣品注入儀器,設(shè)置合適的分析條件,如流速、柱溫等。
(2)配置流動(dòng)相:根據(jù)樣品性質(zhì)和分析需求,選擇合適的流動(dòng)相,并配置成所需的濃度。(3)安裝色譜柱:將色譜柱安裝在儀器系統(tǒng)中,并確保其與進(jìn)樣器、檢測(cè)器等部件連接緊密。(4)進(jìn)樣:將準(zhǔn)備好的樣品通過(guò)進(jìn)樣器送入色譜柱,進(jìn)行分離分析。
儀器操作分為四個(gè)關(guān)鍵步驟:排氣、沖柱前管路、連接色譜柱與采集基線。打開(kāi)軟件,選擇所需使用的檢測(cè)器,確保儀器處于可操作狀態(tài)。隨后,執(zhí)行排氣操作,以消除管路內(nèi)的氣泡,防止堵塞色譜柱。
高效液相色譜基線漂移的原因同解決方法
首先高效液相色譜儀走基線,柱高效液相色譜儀走基線的溫度波動(dòng)是造成基線漂移的重要原因。即使是微小的溫度變化也會(huì)影響檢測(cè)器的靈敏度高效液相色譜儀走基線,導(dǎo)致基線波動(dòng)。其次高效液相色譜儀走基線,不均勻流動(dòng)相條件變化也會(huì)引起基線漂移,其影響甚至大于溫度變化。這可能由高效色譜流動(dòng)相的不均勻性引起。污染或氣體循環(huán)池是另一個(gè)基線漂移的原因。污染物或氣體的循環(huán)可能導(dǎo)致基線不穩(wěn)。
柱溫波動(dòng)。(即使是很小的溫度變化都會(huì)引起簽線的波動(dòng)。通常影響示簽檢測(cè)漏、電導(dǎo)檢測(cè)器、較低靈敏度的某外檢測(cè)器或其它光電類檢測(cè)器。)控制好柱子和流動(dòng)相的溫度,在檢測(cè)器之前使用熱交換錯(cuò)圖,流動(dòng)相不均勻。(流動(dòng)相條件交化引起的基線漂移大于溫度導(dǎo)致的漂移。
流動(dòng)相有沒(méi)有混合均勻。流動(dòng)速度快,流動(dòng)相中的配比在逐漸的發(fā)生變化。第三個(gè)可能性比較小,如果用的是兩個(gè)泵做梯度洗脫,那么泵的運(yùn)行是否異常。這一點(diǎn)可以查看最近一次的校驗(yàn)記錄,看看誤差是否在允許范圍內(nèi)。
在實(shí)際操作中,可以通過(guò)調(diào)整流動(dòng)相的組成、優(yōu)化儀器參數(shù),以及使用合適的溶劑來(lái)控制基線漂移。同時(shí),定期維護(hù)和校準(zhǔn)儀器,確保其性能穩(wěn)定,也是避免基線漂移的有效方法。
安捷倫1260二元梯度高效液相色譜儀基線波浪形是什么故障
1、可能是單向閥堵塞,這個(gè)沒(méi)有辦法,可能只能更換單向閥,這個(gè)配件的價(jià)格相當(dāng)?shù)馁F,如果會(huì)拆的話可以卸下來(lái)超聲一下??赡苁橇鲃?dòng)相氣泡導(dǎo)致的。在線脫氣裝置可以脫去一部分氣泡,但是如果水和有機(jī)相比例比較大,產(chǎn)生氣泡比較多的時(shí)候,建議手動(dòng)混合,然后減壓抽濾脫氣。
2、那是基線噪音來(lái)的,屬于正?,F(xiàn)象,是不可避免的,只要不影響對(duì)主峰的分析或者信噪比在要求范圍內(nèi)就行。
3、流動(dòng)相有沒(méi)有混合均勻。 環(huán)境溫度是否比較高,流動(dòng)相瓶的瓶口有沒(méi)有蓋起來(lái)。如果溫度較高,又敞口放置,有機(jī)相揮發(fā)得較快,因此流動(dòng)相中的配比也在逐漸的發(fā)生變化。 第三個(gè)可能性比較小,如果用的是兩個(gè)泵做梯度洗脫,那么泵的運(yùn)行是否異常。
4、這在操作液相色譜時(shí)是常見(jiàn)的現(xiàn)象。通常,梯度洗脫程序中有機(jī)相的比例會(huì)逐漸增加,而水相的比例則相應(yīng)減少。由于水相的紫外吸收系數(shù)普遍低于有機(jī)相,因此在有機(jī)相比例增加時(shí),基線會(huì)逐漸上升,漂移至幾十毫伏到一百毫伏左右。若漂移過(guò)多,則可能意味著所使用的試劑不適合進(jìn)行梯度洗脫,或者儀器存在問(wèn)題。
5、檢測(cè)器出口阻塞。(高壓造成流通池窗口破裂,產(chǎn)生噪音基線)取出阻塞物或更換管子。參考檢測(cè)器手冊(cè)更換流通池窗。流動(dòng)相配比不當(dāng)或流速變化 更改配比或流速。為避免這個(gè)問(wèn)題可定期檢查流動(dòng)相組成及流速。
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